Способы репаративной регенерации. Репаративная регенерация, её значение Регенерация костной ткани

«Любой ткани организма без исключения свойственна способность к репаративной регенерации в той или иной форме. И если рассматривать процесс в его не далеко зашедших стадиях, то при оптимизации условий, на определённом для каждой ткани уровне возможна и полная репаративная регенерация — реституция».
профессор, доктор биологических наук Л.Д.Лиознер

В публикации на сайте «АЛЛАТРА НАУКА» под названием: меня очень впечатлила информация о практических научных результатах в области вертебрологии, в частности о возможности регенерации повреждённых межпозвонковых дисков вплоть до полного восстановления (полной реституции), благодаря развитию метода вертеброревитологии . Эта информация явилась для меня отправной точной к исследованию данного вопроса.

В переводе на русский язык вертеброревитология означает «наука, дающая вторую жизнь (возвращающая здоровье) позвоночнику». Вертеброревитология включает в себя несколько запатентованных методов, направленных на лечение дегенеративно-дистрофических заболеваний позвоночника, а также послеоперационных рецидивов экструзии пульпозного ядра (грыжи диска). На сегодняшний день вертеброревитология является первым и единственным реальным шагом в вертебрологии (науке о позвоночнике), направленным на этиотропное лечение остеохондроза и его осложнений, о чём свидетельствуют, в первую очередь, объективные (как ближние, так и отдалённые) результаты лечения, подтверждённые снимками МРТ.

Использование в медицине для стимуляции репаративных процессов. Сущность изобретения: применение в качестве препарата, обладающего способностью стимулировать репаративные процессы, дипептида L-Lys-L-Glu. Предлагается лекарственное средство, способное стимулировать регенерацию, содержащее фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество дипептида в качестве активного начала, представляющего собой соединение формулы L-лизил-L-глутаминовая кислота (L-Lys-L-Glu) или его химические модификации в виде солей и других производных. Лекарственное средство предлагается для парентерального, интраназального, перорального и местного применения. Согласно изобретению способ стимуляции регенерации включает профилактическое и/или лечебное введение субъекту, нуждающемуся в этом, лекарственного средства в дозах 0,01-100 мкг/кг массы тела по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта. Технический результат: получено средство пептидной природы, обладающее способностью стимулировать репаративные процессы. 3 с. и 4 з.п.ф-лы, 4 ил., 5 табл.

Изобретение относится к фармакологии, а именно к лекарственным средствам, содержащим пептиды и композиции на их основе, которые могут найти профилактическое и/или лечебное применение в медицине в качестве стимуляторов регенерации тканей при гнойно-воспалительных заболеваниях и послеоперационных осложнениях, трофических нарушениях, заболеваниях и поражениях кожи и слизистых оболочек, последствиях воздействия радиационных, термических и химических факторов, сопровождающихся нарушением репаративных процессов. Изобретение касается применения дипептида L-лизил-L-глутаминовая кислота (L-Lys-L-Glu) в качестве средства, стимулирующего репаративные процессы у субъектов, нуждающихся в этом. Среди наиболее близких аналогов по применению известна группа препаратов, стимулирующих метаболические процессы: производные пиримидина (метилурацил, пентоксил) и биогенные препараты (актовегин, солкосерил) (1). Недостатком метилурацила является то, что при применении препарата возможны аллергические кожные реакции (уртикарная сыпь), иногда головная боль, головокружение. Пентоксил при приеме внутрь в связи с раздражающим действием может вызывать диспептические явления. Недостатком применения актовегина и солкосерила является малый выход из препарата активных веществ, большая продолжительность лечения, ограничения применения в зависимости от стадий раневого процесса и низкая эффективность при лечении гнойных ран. Эти препараты оказывают преимущественно стимулирующее действие на лейкопоэз. Известен дипептид L-Lys-L-Glu, используемый в качестве компонента для пептидного синтеза (2). Известно, что дипептид L-Lys-L-Glu обладает иммуномодулирующей активностью (3). Однако известная активность указанного дипептида характеризует только направленность его иммунобиологического действия, что не является очевидным и взаимосвязанным проявлением свойств дипептида стимулировать репаративные процессы, и не определяет конкретные показания для его клинического применения. Приведенные ниже примеры стимулирующего действия дипептида L-Lys-L-Glu на репаративные процессы объективно подтверждают отсутствие взаимосвязи между известным свойством и заявляемым. Заявляемое изобретение направлено на решение задачи получения средства пептидной природы, обладающего способностью стимулировать репаративные процессы. Задача решена путем применения в качестве средства, обладающего способностью стимулировать репаративные процессы, дипептида со следующей аминокислотной последовательностью: L-Lys-L-Glu. Дипептид получают классическим методом пептидного синтеза в растворе (4). Ранее неизвестное свойство дипептида L-Lys-L-Glu стимулировать репаративные процессы выявлено при его экспериментальном изучении. Согласно изобретению предлагается лекарственное средство, способное стимулировать регенерацию, которое содержит фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество дипептида в качестве активного начала, представляющего собой соединение формулы L-лизил-L-глутaминoвaя кислота (L-Lys-L- Glu) или его химические модификации (например, в виде солей и других производных). Понятие "лекарственное средство", используемое в данной заявке, подразумевает использование любой лекарственной формы, содержащей различные фармацевтические производные дипептида, которые обладают терапевтическим эффектом для лечения заболеваний, при которых необходима стимуляция регенерации тканей. Понятие "эффективное количество", используемое в данной заявке, подразумевает использование того количества активного начала, которое в соответствии с его количественными показателями активности и токсичности, а также на основании знаний специалиста должно быть эффективным в данной препаративной форме. Для получения фармацевтических композиций, отвечающих изобретению, предлагаемый дипептид или его фармацевтически приемлемые производные смешиваются как активный ингредиент с фармацевтическим носителем согласно принятым в фармацевтике способам компаундирования. Носитель может иметь различные формы, которые зависят от лекарственной формы препарата, желаемой для введения в организм, например, парентерального, интраназального, перорального или местного (например, в виде аппликаций, мази). При изготовлении композиций в предпочтительной дозированной форме для перорального или местного применения могут использоваться любые известные фармацевтические компоненты. Для парентерального (интраназального) введения носитель обычно включает стерильную воду, хотя могут быть включены другие ингредиенты, способствующие стабильности, или для сохранения стерильности. Согласно изобретению дипептид активен при введении его в дозах 0,01-100 мкг/кг массы тела, хотя могут быть использованы и более низкие (высокие) дозы в зависимости от степени тяжести и характера течения заболевания. Заявляемое лекарственное средство предлагается для парентерального, интраназального, перорального и местного применения. Изобретение охватывает способ стимуляции процессов регенерации у человека или животного, нуждающихся в такой стимуляции, а также охватывает фармацевтические композиции для осуществления этого способа. Согласно изобретению способ стимуляции процессов регенерации путем введения лекарственного средства, содержащего в качестве активного начала дипептид формулы L-лизил-L-глутаминовая кислота (L-Lys-L- Glu) или его химические модификации в виде солей и других производных, проявляется в активации клеточного метаболизма и регулирующем влиянии на процессы пролиферации и дифференцировки клеток различных тканей. Способ включает профилактическое или лечебное введение субъекту, нуждающемуся в этом, заявляемого лекарственного средства в дозах 0,01 - 100 мкг/кг массы тела по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта - 10-40 дней в зависимости от характера течения и тяжести заболевания. Изобретение охватывает профилактику и/или лечение заболеваний, при которых необходима стимуляция регенерации тканей: гнойно-воспалительные заболевания и послеоперационные осложнения, трофические нарушения, заболевания и поражения кожи и слизистых оболочек, последствия воздействия радиационных, термических и химических факторов, сопровождающиеся нарушением репаративных процессов. Изобретение иллюстрируется примером синтеза дипептида формулы L-лизил-L-глутаминовая кислота (L-Lys-L-Glu) (пример 1), примерами испытания токсичности и биологической активности дипептида (примеры 2, 3, 4, 5) и примерами результатов клинического применения дипептида, демонстрирующими его фармакологические свойства и подтверждающими возможность достижения лечебного эффекта (примеры 6, 7, 8). Пример 1. Синтез дипептида L-Lys-L-Glu. 1. N ,N - дибензилоксикарбониллизил - - бензилглутаминовая кислота [I]. 0,154 г (0,65 ммоль) - бензилглутаминовой кислоты суспензируют в 3 мл диметилформамида, при перемешивании добавляют 0,091 мл (0,65 ммоль) триэтиламина, затем 0,300 г (0,59 ммоль) N-оксисукцинимидного эфира N ,N - дибензилоксикарбониллизина. Реакционную смесь перемешивают 12 часов при комнатной температуре. После этого растворитель упаривают в вакууме при 40 o C, к остатку добавляют 10 мл 1н H 2 SO 4 и дважды экстрагируют продукт этилацетатом (30х2). Органический слой промывают 1н H 2 SO 4 , водой до нейтральной реакции, сушат над Na 2 SO 4 . Отгонку растворителя проводят в вакууме при 40 o C, остаток растворяют в 1-2 мл этилацетата и высаживают продукт гексаном. Затем перекристаллизируют в системе этилацетат/гексан. Продукт отфильтровывают и сушат в вакууме над P 2 O 5 . Выход 0,330 г (88%). Коэффициент удерживания R f = 0,81 (бензол: ацетон 1:1, силуфол). 2. L-Лизил-L-Глутаминовая кислота. Защищенный дипептид [I] 0,330 г растворяют в 10 мг метанола, добавляют 3 мл воды и гидрируют над палладием на угле. Контроль по тонкослойной хроматографии. По окончании гидрирования катализатор отфильтровывают, остаток растворяют в минимальном количестве воды и высаживают метанолом. Продукт отфильтровывают, промывают этанолом, сушат в вакууме над P 2 O 5 . Выход 0,110 г (85%). Т пл. 194 - 196 o C. 2 0 = + 20,0 o (с = 3,0; H 2 O). R f = 0,54 (ацетонитрил: вода 1:3, "Merk"). Электрофорез: E Gly = 1,96; E His = 0,98 (1400 Вт, 45 мин, 2% уксусная кислота, "Watmann ЗММ". Пример 2. Изучение токсичности дипептида L-Lys-L-Glu. Изучение общетоксического действия дипептида L-Lys-L-Glu проводилось в соответствии с "Правилами доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP)", утвержденными Приказом Министерства медицинской промышленности СССР от 17.05.91 N 154 и введенными в действие с 1 января 1992 г. Цель изучения состояла в определении переносимых токсических доз препарата, оценке степени и характера патологических изменений в различных органах и системах организма и выявлении зависимости токсических эффектов от дозы и длительности применения препарата. Определение острой токсичности дипептида L-Lys-L-Glu проводили по методу Кербера. Исследование проведено на 66 белых беспородных мышах-самцах массой 20-23 г, содержавшихся на стандартном режиме и получавших стандартное питание в условиях вивария. Животные были разделены случайным распределением на 6 равных групп по 11 мышей в каждой. Препарат вводили животным однократно внутримышечно в объеме 0,25 мл в дозах 1 мг/кг, 2 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, 5 мг/кг (в несколько тысяч раз превышающих терапевтическую дозу, рекомендуемую для клинического изучения). Животным контрольной группы в том же объеме вводился физиологический раствор. В течение 72 часов и далее через 14 суток ни в одной группе животных гибели мышей не обнаружено. Не отмечено каких-либо изменений общего состояния, поведения, двигательной активности, волосяного и кожного покрова, физиологических отправлений животных. Таким образом, дипептид L-Lys-L-Glu в дозах, превышающих терапевтическую, рекомендуемую для клинических испытаний, в несколько тысяч раз, не вызывает острых токсических реакций, что указывает на большую терапевтическую широту препарата. Исследование подострой токсичности дипептида L-Lys-L-Glu проведено на 60 белых беспородных крысах массой 150-250 мг. Ежедневно однократно животным опытных групп вводили препарат внутримышечно в течение 90 дней в дозах 1 мкг/кг, 0,3 мг/кг, 3 мг/кг в 0,5 мл физиологического раствора. Животным контрольной группы вводили в том же объеме физиологический раствор. На протяжении всего периода исследования животные находились под ежедневным наблюдением. Отмечали поведение животных, потребление корма и воды, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек. Проводили еженедельное взвешивание животных. До введения препарата, на 30, 60 и 90 сутки после начала введения препарата у животных исследовали морфологический состав и свойства периферической крови. При завершении эксперимента исследовали биохимические и коагулологические показатели крови. Хроническую токсичность дипептида L-Lys-L-Glu, полученного заявляемым способом, изучали при длительном введении его крысам массой 150-250 мг. Животным ежедневно вводили внутримышечно препарат в дозах 1 мкг/кг, 0,1 мг/кг, 1 мг/кг в 0,5 мл физиологического раствора в течение 6 месяцев. Отмечали поведение животных, потребление корма и воды, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек. Взвешивание животных проводилось ежедневно в первые 3 месяца эксперимента, затем 1 раз в месяц. Через 3 месяца после начала введения и при завершении эксперимента проводили гематологические и биохимические исследования. Оценивали функции сердечно-сосудистой системы, печени, поджелудочной железы, почек и надпочечников. После окончания введения препарата часть животных подвергали патоморфологическому исследованию с целью оценки состояния различных отделов головного и спинного мозга, сердца, аорты, легких, печени, почек, органов эндокринной и иммунной систем. При оценке общего состояния животных, морфологических и биохимических показателей периферической крови, морфологического состояния внутренних органов, состояния сердечно-сосудистой и дыхательной систем, функции печени и почек патологические изменения в организме не обнаружены. Изучение подострой и хронической токсичности дипептида L-Lys-L-Glu свидетельствует об отсутствии побочных эффектов при длительном применении препарата в дозах, превышающих терапевтическую в 100-1000 раз. Пример 3. Влияние дипептида L-Lys-L-Glu на заживление гнойных резано-размозженных ран мягких тканей Эффективность дипептида L-Lys-L-Glu оценивали на модели гнойной резано-размозженной раны мягких тканей бедра у 18 кроликов породы "Шиншилла" обоего пола массой тела от 2 до 3 кг. С этой целью у кроликов выбривали шерсть в области мягких тканей бедра и проводили разрез длиной 5 см и глубиной 2 см. Мягкие ткани (мышцы, подкожную клетчатку) раздавливали зажимом Кохера, инфицировали смесью возбудителя: Staphylococcus aureus, штамм 186. На кожу накладывали швы. Через 72 часа непрорезавшиеся швы снимали, проводили обработку ран 3%-ным раствором перекиси водорода. Животным подопытной группы вводили ежедневно однократно внутримышечно дипептид L-Lys-L-Glu в дозе 1 мкг на инъекцию в течение 5 сут. Кроликам контрольной группы по аналогичной схеме вводили физиологический раствор. В процессе лечения проводили обработку ран с применением наружных антисептических средств. При оценке эффективности дипептида L-Lys-L-Glu учитывали динамику регресса воспалительного процесса, сроки отторжения струпа и очищения ран от гнойно-некротических масс, появления грануляционной ткани в ране и начала краевой эпителизации. С целью определения объективных критериев течения раневого процесса на 6, 14, 21, 28 и 40 сутки анализировали показатели, отражающие полуколичественные характеристики отдельных клеточных элементов и структур образующейся грануляционной ткани, а также активность тканевых ферментов (5, 6, 7). В результате исследования установлено, что во всех группах в первой фазе воспаления на 6 сутки в тканях отмечаются обширные некрозы, окруженные узким ободком грануляционной ткани с диффузно расположенными молодыми фибробластами и единичными гистиоцитами. В фазе пролиферации мелкие очаги некроза были окружены широким слоем грануляционной ткани, в которой было много сосудов и лимфоидных клеток. Число гистиоцитов нарастало, а макрофаги образовывали скопления в некротических зонах. Фибробласты вытянуты, с тонкими ядрами. Особенно выражены процессы активизации клеточных элементов были у животных подопытной группы (табл. 1 (табл. 1-5 см. в конце описания). В фазе рубцевания у этих животных отмечались очаги некроза, окруженные слоем грануляционной ткани со зрелыми фибробластами. Между фибробластами была прослойка коллагеновых волокон. В межуточном веществе вблизи зон некроза были сосредоточены преколлагеновые волокна, фибробласты, гистиоциты, что указывало на процесс рассасывания и замещения некротизированных тканей молодой грануляционной тканью. Отличительной чертой реакции тканей на применение дипептида L-Lys-L-Glu являлась высокая активность кислой фосфатазы в гистиоцитах в фазу пролиферации (14 - 28 сутки). В незначительных очагах лейкоцитарной инфильтрации, а также в эндотелии сосудов наблюдалась высокая активность щелочной фосфатазы. В фазе рубцевания стабилизировалось на высоком уровне содержание кислой фосфазы в гистиоцитах, а щелочной фосфатазы - в лейкоцитах и сосудах (табл. 2). Наблюдаемые изменения свидетельствуют об активизации процессов клеточного метаболизма в тканях, способствующей более быстрому очищению раневой поверхности от некротизированных тканей и эпителизации раны (табл. 3). Пример 4. Влияние дипептида L-Lys-L-Glu на компенсаторную регенерацию печени после частичной гепатэктомии Исследование проведено на 26 белых беспородных крысах-самцах массой 150-200 г. Животные были разделены на 3 группы: 1 группа - здоровые животные, 2 группа-контроль (крысы, которым была произведена частичная гепатэктомия с удалением 2/3 печени), 3 группа - прооперированные животные, которым затем вводили подкожно через 2 и 24 часа после операции по 0,1 мл дипептида L-Lys-L-Glu (по 0,1 мкг на крысу). В эти же сроки животным 1-й и 2-й групп вводили физиологический раствор в том же объеме. Удаленную во время операции печень фиксировали в формалине. Прооперированные крысы были умерщвлены эфиром через 32 и 96 часов после операции. В это же время забивали и крыс контрольной группы. Печень крыс фиксировали в формалине. После окраски препаратов гематоксилин-эозином определяли митотический индекс в клетках печени, а также количество полиплоидных клеток, находящихся в S-фазе клеточного цикла (количество делящихся клеток). Изучение митотической активности клеток регенерирующей печени через 32 часа после частичной гепатэктомии показало, что число митозов и клеток в S-фазе клеточного цикла становится в два раза больше, чем в печени здоровых животных. Эти отличия недостоверны в случае введения физиологического раствора, тогда как после инъекций дипептида L-Lys-L-Glu увеличение количества митозов, клеток, синтезирующих ДНК, и общей суммы делящихся клеток становится достоверным (табл. 4). При изучении препаратов печени через 96 часов после гепатэктомии оказалось, что и у крыс, получавших физиологический раствор, и у крыс, получавших дипептид L-Lys-L-Glu, наблюдается значительное усиление митотической активности гепатоцитов. При сравнении данных подопытной (третьей) и контрольной (второй) групп выяснилось, что у крыс, которым вводили дипептид L-Lys-L-Glu, наблюдается количество митозов, в два раза большее, чем у крыс, получавших физиологический раствор. Количество клеток, находящихся в S-фазе митотического цикла, у крыс подопытной группы не отличалось достоверно от количества гепатоцитов в S-фазе в контрольной группе, хотя в целом количество делящихся клеток через 96 часов после гепатэктомии в регенерирующей печени крыс с введением дипептида L-Lys-L-Glu было на 75% больше, чем у крыс после введения физиологического раствора (табл. 4). Таким образом, установлено, что при введении крысам дипептида L-Lys-L-Glu через 96 часов после частичной гепатэктомии наблюдается усиление митотической активности гепатоцитов, свидетельствующей об ускорении репаративных процессов в печени. Пример 5. Влияние дипептида L-Lys-L-Glu на регенерацию слизистой оболочки кишечника после радиационного повреждения. Работа выполнена на 24 самцах белых крыс линии Вистар в возрасте 2-х месяцев, имеющих массу тела 90-100 г. Исследования проведены на трех группах животных: 1 группа - здоровые животные, 2 группа - контроль (облученные животные), 3 группа - введение дипептида L-Lys-L-Glu облученным животным. Общее однократное гамма-облучение животных в дозе 6 Гр, вызывающее "синдром кишечной гибели", выполнено на кобальтовом аппарате ГУБ 20000 при мощности дозы 200 рад/мин. Дипептид L-Lys- L-Glu вводили через 24 часа после облучения по 0.5 мкг в объеме 0,5 мл физиологического раствора внутрибрюшинно в течение 5 дней. Животные 1-й и 2-й групп получали физиологический раствор по той же схеме. Изучение действия дипептида L-Lys-L-Glu у облученных животных выполнено на проксимальном отделе двенадцатиперстной кишки. Забой животных проведен под нембуталовым наркозом (50 мг/кг) на 8 сутки после облучения (начало периода репаративной регенерации). Кусочки кишки фиксировали в течение 24 ч по Карновскому для электронной микроскопии. Ультраструктурные исследования проводили в электронном микроскопе JEM-100S (JEOL, Япония) на ультратонких срезах, приготовленных на ультрамикротоме LKB-7A (LKB, Швеция), контрастированных уранилацетатом и цитратом свинца. Тучные клетки селективно окрашивали 1%-ным раствором толуидинового синего (Fluka) в 0,5 М HCl при pH 0,5 (8, 9). Для изучения пролиферативной активности клеток использовали мышиные моноклональные антитела к пролиферирующему клеточному ядерному антигену (proliferating cell nuclear antigen - PCNA) при разведении 1:50 (клон PC 10, Calbiochem, США) и авидин-биотин-пероксидазный набор для выявления мышиных иммуноглобулинов (Vectastain, США). Серотонин-позитивные клетки выявляли с помощью поликлональных кроличьих антител к серотонину (Ready-to-Use) и стрептавидин-биотин-пероксидазного набора (BioGenex, США). Для выявления металлотионеин-позитивных клеток (MTL-позитивных клеток) применяли кроличьи антитела к металлотионеинам (1:2000). Иммуногистохимическое выявление антигенов на гистологических срезах выполнено согласно основным требованиям для иммунопероксидазных методов (10, 11). Количественные исследования выполнены с помощью системы компьютерного анализа микроскопических иображений IMSTAR (Imstar, Франция) с применением прикладных компьютерных лицензионных программ Morphostar-2 и Colquant-2, согласно основным принципам стереологии в морфометрии (12, 13). Для каждого животного подсчет соответствующих структур проводили в 10 визуальных полях зрения по трем срезам исследуемого органа. Митотический индекс (I mit) и индекс пролиферирующей способности (I pcna) клеток в двенадцатиперстной кишке определяли в 10-15 стандартных сечениях крипт с общим содержанием не менее 1000 ядер энтероцитов. Тестовая площадь для определения серотонин-позитивных клеток и тучных клеток составляла не менее 3 мм 2 . MTL-позитивные клетки подсчитывали в 100 криптах кишки. При действии ионизирующего излучения на 8 сутки отмечается частичное, в ряде случаев почти полное восстановление ультраструктуры энтероцитов, однако продолжают встречаться гиперплазированные ("раздутые") митохондрии, отек эндоплазматического ретикулума, очаговая вакуолизация цитоплазмы. При этом эндокринные клетки выглядят к этому сроку практически неизмененными. Количественные изменения в двенадцатиперстной кишке выживших на 8 сутки после общего гамма-облучения в дозе 6 Гр имеют следующие особенности: I pcna в криптах кишечника возрастает до 46,5%, а митотический индекс - до 4,2% (табл. 5). Эти данные свидетельствуют, что восстановление эпителиального слоя слизистой у выживших животных протекает очень быстро, а пул стволовых клеток кишечного эпителия в этот период находится на стадии гиперрегенерации (фиг. 1а). Гистологическое изучение препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, также указывает на то, что архитектоника эпителиальной выстилки начинает нормализоваться. Однако результаты компьютерного анализа показывают, что численная плотность энтерохромаффинных клеток (фиг. 2а) и MTL-позитивных клеток (фиг. 3а) еще не достигает уровня показателей у здоровых животных. Содержание тучных клеток в собственной пластинке слизистой у облученных животных снижено почти в 10 раз (фиг. 4а), что свидетельствует о крайне высокой радиочувствительности мукозного типа тучных клеток к действию ионизирующего излучения и очень медленном восстановлении их количества даже при воздействии сублетальных доз. При введении дипептида L-Lys-L-Glu следует отметить выраженную активизацию структур эндоплазматического ретикулума и пластинчатого комплекса в эндокринных клетках кишечника, что может свидетельствовать о его стимулирующем влиянии на процессы синтеза и секреции гормонов. Согласно результатам морфометрического анализа, в криптах кишечника облученных животных после инъекций дипептида L-Lys-L-Glu отмечается существенная активизация восстановительных процессов (фиг. 1б). Индекс PCNA достигает 49,8%, а митотический индекс увеличивается до 4,7% (табл. 5). Количественная плотность энтерохромаффинных клеток практически достигает уровня значений у здоровых животных. Прослеживается тенденция к увеличению числа и интенсивности иммуноокрашивания MTL-позитивных клеток в основании крипт (фиг. 3б). Применение дипептида L-Lys-L-Glu усиливает пролиферативный потенциал стволовых клеток кишечника и способствует морфофункциональной регенерации слизистой оболочки кишечника после общего однократного гамма-облучения в дозе 6 Гр. Таким образом, в результате экспериментального изучения установлено, что дипептид L-Lys-L-Glu не обладает токсичностью, активизирует метаболические процессы и пролиферативную активность клеток различных тканей, способствуя их регенерации. Выявленные в результате экспериментального доклинического исследования свойства дипептида L-Lys-L-Glu позволяют считать показанным его профилактическое и/или лечебное применение в качестве стимулятора регенерации тканей при гнойно-воспалительных заболеваниях и послеоперационных осложнениях, трофических нарушениях, заболеваниях и поражениях кожи и слизистых оболочек, последствиях воздействия радиационных, термических и химических факторов, сопровождающихся нарушением репаративных процессов. Приведенные ниже примеры результатов клинического изучения заявляемого дипептида демонстрируют его фармакологические свойства и подтверждают возможность осуществления изобретения. Пример 6. Эффективность применения дипептида L-Lys-L-Glu при воспалительных заболеваниях слюнных желез и слюнокаменной болезни. Под наблюдением находилось 45 пациентов. С воспалительными заболеваниями слюнных желез - 27 человек, из них у 4 была поражена околоушная железа. Со слюнокаменной болезнью подчелюстной слюнной железы - 18 человек. Средний возраст больных - 35-40 лет. Всем больным со слюнокаменноой болезнью проведено удаление камней. Тридцати больным (15 с воспалением слюнных желез и 15 со слюнокаменной болезнью) вводили дипептид L-Lys-L-Glu внутримышечно ежедневно по 1 мкг в течение 5 суток. Больные контрольной группы получали традиционное лечение: антибактериальное, десенсибилизирующая терапия, повязки с иод-димексидом, физиолечение (УВЧ, электрофорез с йодистым калием - 5-10% на область железы), местное лечение (промывание железы раствором антисептиков с антибиотиками). У больных со слюнокаменной болезнью, леченных дипептидом L-Lys-L-Glu, прекращалось гнойное отделяемое из протоков железы, в послеоперационном периоде рана в полости рта заживала первичным натяжением, без осложнений. Отек и инфильтрация мягких тканей, слизистой оболочки полости рта рассасывались на 3-4 день после операции. Железа значительно уменьшалась в размерах и прекращались боли. У больных с воспалением слюнных желез, леченных дипептидом L-Lys-L-Glu, на 4-5 день после лечения прекращались боли в железе и гнойное отделяемое из протока железы, увеличивалось слюноотделение, рассасывались отек и инфильтрация мягких тканей, при пальпации железа значительно уменьшалась в размере и становилась безболезненной. Улучшалось общее самочувствие пациентов. Наблюдалась нормализация лабораторных показателей. Таким образом, применение дипептида L-Lys-L-Glu способствовало уменьшению воспалительных явлений, более быстрой регенерации ран, сокращению сроков лечения. Пример 7. Эффективность применения дипептида L-Lys-L-Glu при гнойно-воспалительных заболеваниях различной локализации. Дипептид L-Lys-L-Glu применяли в комплексном лечении 15 больных с поверхностными вялогранулирующими ранами верхних и нижних конечностей и 19 больных с флегмонами челюстно-лицевой области. Препарат вводили внутримышечно ежедневно по 1 мкг в течение 10 суток. Эффективность лечения оценивали в динамике по изменению активности раневых ферментов и сроков заживления ран. Установлено, что применение дипептида L-Lys-L-Glu было наиболее эффективно у больных с низкой активностью раневых протеолитических энзимов в первой и второй фазе раневого процесса, некротическим типом цитограмм и замедленным процессом заживления ран. Дипептид L-Lys-L-Glu повышал активность раневых ферментов в первую фазу раневого процесса, что вызывало адаптационную перестройку в ране и приводило к усилению синтеза кислой фосфатазы в гистиоцитах, щелочной фосфатазы в лейкоцитах и цитохрома C в макрофагах, способствующих усилению репаративных процессов. Введение дипептида способствовало ускорению сроков очищения ран от некротических тканей и заживлению ран за счет активации макрофагов, фибробластов и лейкоцитов в очаге воспаления. В результате лечения дипептидом L-Lys-L-Glu отмечались более быстрая ликвидация местного воспалительного процесса, улучшение общего состояния больных и сокращение сроков лечения. Пример 8. Эффективность применения дипептида L-Lys-L-Glu при осложненном течении послеоперационного периода у онкологических больных. Дипептид L-Lys-L-Glu применяли в комплексном лечении 9 больных с вялогранулирующими послеоперационными ранами после операционных вмешательств по поводу рака легкого II-III стадий и рака желудка II-III стадий. Больным в период предоперационной подготовки проводили лучевую терапию по радикальной программе с использованием крупных полей сложной конфигурации на линейном ускорителе электронов с энергией 4,3 МэВ и гамма-терапевтическом аппарате "Рокус-М" в тормозном режиме. В отдельных случаях в качестве компонента комбинированного лечения назначали химиотерапию. Дипептид L-Lys-L-Glu вводили, начиная с 3 суток после операции внутримышечно ежедневно по 1 мкг в течение 10 суток. Установлено, что применение препарата способствовало уменьшению отека и боли в области раны, ускорению сроков очищения ран от некротических тканей и формирования послеоперационного рубца. На фоне лечения у больных отмечались нормализация температуры, улучшение аппетита и более быстрое восстановление массы тела. Таким образом, применение дипептида L-Lys-L-Glu в комплексном лечении онкологических больных стимулирует репаративные процессы в тканях, вызывает улучшение общего состояния больных и сокращение сроков лечения. Клиническое применение дипептида L-лизил-L-глутaминoвaя кислота (L-Lys-L-Glu) подтвердило данные экспериментального исследования о том, что препарат эффективен при заболеваниях и состояниях, сопровождающихся нарушением репаративных процессов. Источники информации 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух частях. - М.: Медицина, 1993. - 4.2.-С. 161-191 2. SERVA - Catalog. - Heidelberg, 1987/88. - РЕ I - РЕ 40. 3. Патент РФ N 2080120. Средство, обладающее иммуномодулирующей активностью. БИ N 15.27.05.97. 4. Якубке Х.-Д., Ешкайт X. Аминокислоты, пептиды, белки: Пер. с нем. -М. : Мир, 1985. -456 с. 5. Балин В.Н., Мадай Д.Ю., Цвигайло Д.А. Местное лечение гнойных хирургических заболеваний кожи и подкожной клетчатки в условиях регулируемой активности раневых энзимов. - СПб., 1996. - 37 с. 6. Колодин В.И., Кузнецов O.K. Количественное цитохимическое выявление ферментов в культурах клеток после заражения вирусом Рауса // Вопросы онкологии. - 1975. - Т. 21, N 9. -С. 65-71. 7. Берстон М. Гистохимия ферментов. - М.: Мир, 1965. - 464 с. 8. Enerback L. , Miller H.R.P., Mayrhofer G. Methods for the identification and characterization of mast cells by light microscopy // Mast cell differentiation and heterogeneity / Eds. A.D.Befus et al.- Raven Press, New York, 1986.- P. 405-416. 9. Stead R.H., Dixon M.F., Bramwell N.H. et al. Mast cells are closely apposed to nerves in the human gastrointestinal mucosa // Gastroenterology. -1987. -Vol. 87.-P. 575-585. 10. Полак Дж. , Ван Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы: Пер. с англ.- М.: Мир, 1987. -74 с. 11. Кветной И. М. , Южаков В.В. Окрашивание ткани эндокринных желез и элементов АПУД-системы // Микроскопическая техника: Руководство / Ред.: Д.С. Саркисов, Ю.Л.Перов.- М.: Медицина, 1996. -С. 375 - 418. 12. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство. М.: Медицина, 1990. -384 с. 13. Weibel E. R. , Kistler G.S., Scherle W.F. Practical stereological methods for morphometric cytology// J. Cell Biol. -1966. -Vol. 30. -P. 23-38.

Формула изобретения

1. Применение дипептида L-Lys-L-Glu в качестве средства, стимулирующего репаративные процессы. 2. Лекарственное средство для профилактики и/или лечения заболеваний, при которых необходима стимуляция репаративных процессов, содержащее активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, отличающееся тем, что в качестве активного начала содержит эффективное количество дипептида L-Lys-L-Glu или его химические модификации в виде солей. 3. Средство по п.2, где оно представлено в виде лекарственной формы для парентерального введения. 4. Средство по п.2, где оно представлено в виде лекарственной формы для интраназального введения. 5. Средство по п.2, где оно представлено в виде лекарственной формы для перорального введения. 6. Средство по п.2, где оно представлено в виде лекарственной формы для местного введения. 7. Способ профилактики и/или лечения нарушений репаративных процессов при гнойно-воспалительных заболеваниях и послеоперационных осложнениях, трофических нарушениях, заболеваниях и поражениях кожи и слизистых оболочек, последствиях воздействия радиационных, термических и химических факторов, заключающийся в парентеральном, интраназальном, пероральном или местном введении лекарственного средства по п.2 в дозе 0,01 - 100 мкг/кг массы тела по крайней мере один раз в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта.

Выделяют типичную (гомоморфоз) и атипичную репаративную (гетероморфоз) регенерацию.

При типичной регенерации утраченная часть замещается путём развития точно такой же части. Причиной утраты может быть внешнее воздействие (например, ампутация), или же животное намеренно отрывает часть своего тела (автотомия), как ящерица, обламывающая часть своего хвоста, спасаясь от врага.

При атипичной регенерации утраченная часть замещается структурой, отличающейся от первоначальной количественно или качественно. У регенерировавшей конечности головастика число пальцев может оказаться меньше исходного, а у креветки вместо ампутированного глаза может вырасти антенна.

Восстановление утраченных органов осуществляется путем эпиморфоза, морфоллаксиса и эндоморфоза.

Эпиморфоз – отрастание утраченного органа от раневой поверхности. При этом регенерация начинается с рассасывания тканей, прилегающих к ране, и интенсивного размножения клеток, из которых образуется регенерационный зачаток. Дальнейшее размножение клеток приводит к увеличению зачатка, и дифференцировка клеток – к формированию органа. К эпиморфозу примыкает рубцевание, при котором происходит закрытие раны, но без восстановления утраченного органа.

Морфоллаксис ведет за собой перегруппировку оставшейся части организма.эта форма связана с дальнейшим значительным разрушением оставшейся части и завершается образованием из этого материала целого организма или органа. Новая особь (или восстановленный орган) сначала оказывается меньше исходной и равно лишь взятому фрагменту, но в дальнейшем увеличивается. Обычно эпиморфоз и морфоллаксис сопутствуют друг другу, но в одних случаях преобладает первая форма, в других – вторая.

Атипичная, неполная регенерация, происходящая внутри органа – эндоморфоз, или регенерационная гипертрофия – восстановление, идущее внутри органа. При этом восстанавливается не форма, а масса органа. Регенерация начинается с заживления раны, а затем – увеличение оставшейся части органа за счет размножения клеток и гипертрофии. Отрастание от раневой поверхности не происходит, поэтому восстановившийся в размерах орган сохраняет форму культи. Так протекает регенерация печени у млекопитающих, трахейных жабр личинок и насекомых.

4.36.Трансплантация органов и тканей. Проблема тканевой несовместимости .

Трансплантация (позднелат. transplantatio, от transplanto – пересаживаю), пересадка тканей и органов.

Трансплантация у животных и человека – приживление органов или участков отдельных тканей для замещения дефектов, стимулирования регенерации, при косметических операциях, а также в целях эксперимента и тканевой терапии. Организм, от которого берут материал для трансплантации, называют донором, организм, которому приживляют пересаживаемый материал, – реципиентом, или хозяином.

Виды трансплантации:

Аутотрансплантация – пересадка частей в пределах одной особи.

Гомотрансплантация – пересадка от одной особи к другой особи того же вида.

Гетеротрансплантация – пересадка, при которой донор и реципиент относятся к разным видам одного рода.

Ксенотрансплантация – пересадка, при которой донор и реципиент относятся к разным родам, семействам и даже отрядам.

Все виды трансплантации, противопоставляемые аутотрансплантации, называются аллотрансплантацией.

Трансплантируемые ткани и органы. В клинической трансплантологии наибольшее распространение получила аутотрансплантация органов и тканей, т.к. при этом виде пересадок отсутствует тканевая несовместимость. Более часто проводят трансплантации кожи, жировой ткани, фасций (соединительная ткань мышц), хряща, перикарда, костных фрагментов, нервов.

В реконструктивной хирургии сосудов широко применяется трансплантация вен, особенно большой подкожной вены бедра. Иногда для этой цели используют резецированные артерии – внутреннюю подвздошную, глубокую артерию бедра.

Примером органной аутотрансплантации является пересадка почки, которую проводят при протяженных стенозах (сужениях) мочеточника или с целью экстракорпоральной реконструкции сосудов ворот почки.

Особый вид аутотрансплантации – переливание собственной крови больного при кровотечениях или преднамеренной эксфузии (изъятия) крови из кровеносного сосуда больного за 2-3 суток перед операцией с целью ее инфузии (введения) ему же во время оперативного вмешательства. Массовым является переливание аллогенной крови (крови братьев, сестер или родителей) и ее компонентов.

ТКАНЕВАЯ НЕСОВМЕСТИМОСТЬ, иммунная реакция организма, направленная против чужеродных клеток (тканей) и вызванная различиями их антигенного состава. В основе механизма несовместимости тканей лежит реакция антител организма-хозяина на антигены клеточных мембран пересаживаемой или вводимой ткани. Результаты тканевой несовместимости – отторжение пересаженной ткани или органа, осложнения при переливании крови и беременности. Для преодоления этих последствий при подборе пары донор – реципиент учитывают их совместимость по антигенному составу ткани и группам крови. После пересадки реципиенту назначают иммунодепрессанты, подавляющие активность иммунных клеток и образование антител.

Репаративная регенерация – восстановление поврежденных тканей и органов после чрезвычайных воздействий. При полной регенерации восстанавливается полное исходное строение ткани после ее повреждения, её архитектура остается неизменной. Распространена у организмов, способных к бесполому размножению. Например, белая планария, гидра, моллюски (если удалить голову, но оставить нервно – узловую структуру). Типичная репаративная регенерация возможна у высших организмов, в т.ч. и человека. Например, при устранении некротических клеток органов. В острой стадии пневмонии происходит деструкция альвеол и бронхов, затем происходит восстановление. При действии гепатотропных ядов возникают диффузные некротические изменения печени. После прекращения действия ядов восстанавливается архитектоника за счет деления гепатоцитов – клеток печеночной паренхимы. Восстанавливается исходная структура. Гомоморфоз – восстановление структуры в том виде, в котором она существовала до разрушения. Неполная репаративная регенерация – регенерированный орган отличается от удаленного - гетероморфоз. Исходная структура не восстанавливается, а иногда вместо одного органа развивается другой орган. Например, глаз у рака. При удалении в некоторых случаях развивается антенна. У человека печень при удалении части печеночной доли аналогично регенерирует. Возникает рубец и через 2 - 3 месяца после операции масса печени восстанавливается, а восстановления формы органа не происходит. Это происходит из-за удаления и повреждения соединительной ткани во время операции.

У млекопитающих могут регенерировать все 4 вида ткани.

1. Соединительная ткань . Рыхлая соединительная ткань обладает высокой способностью к регенерации. Лучше всего регенерируют интерстициальные компоненты – образуется рубец, замещающийся тканью. Костная ткань – аналогично. Основные элементы, восстанавливающие ткань – остеобласты (малодифференцированные камбиальные клетки костной ткани);

2. Эпителиальная ткань . Обладает выраженной регенерационной реакцией. Эпителий кожи, роговая оболочка глаза, слизистые оболочки полости рта, губ, носа, желудочно-кишечного тракта, мочевого пузыря, слюнные железы, паренхима почек. При наличии раздражающих факторов могут происходить патологические процессы, приводящие к разрастанию тканей, что приводит к раковым опухолям.

3. Мышечная ткань . Значительно меньше регенерирует, чем эпителиальная и соединительная ткани. Поперечная мускулатура – амитоз, гладкая – митоз. Регенерирует за счет недифференцированных клеток – сателлитов. Могут разрастаться и регенерировать отдельные волокна, и даже целые мышцы.

4. Нервная ткань . Обладает плохой способностью к регенерации. В эксперименте показано, что клетки периферической и вегетативной нервной системы, двигательные и чувствительные нейроны в спинном мозге мало регенерируют. Аксоны хорошо регенерируют за счет Шванновских клеток. В головном мозге вместо них - глия, поэтому регенерация не происходит.

При регенерации миокарда и центральной нервной системы сначала образуется рубец, а затем идет регенерация за счет увеличения размеров клеток, внутриклеточная регенерация также имеет место. Клетки миокарда митозом не делятся. Разница происходит из-за развития в эмбриональном периоде. У взрослых организмов очень мощно функционирует ЭПР и это тормозит клеточное деление.

Процесс регенерации конечности у тритона/ саламандры .

После ампутации регенерация конечности происходит строго упорядоченно, всегда одинаково. Восстанавливающийся конец округляется, затем приобретает коническую форму, растет в длину, становится похожим на ласт. Потом закладываются пальцы. К 8 неделе регенерация конечности полностью завершена.

На клеточном уровне выделяют несколько фаз регенерации конечности:

1) фаза заживления раны;

2) процесс демонтирования;

3) фаза « конической бластемы»;

4) фаза редифференцировки.

Фаза заживления раны . В этот период происходит обрастание клетками раны на культе, возникает апикальная «шапочка» (если контакт нарушен – регенерации не будет).

Процесс демонтирования . После заживления, в тканях, прилежащих к культе, происходит рассасывание ткани. Мышечные волокна утрачивают упорядоченность, становятся «растрепанными». В костной ткани утрачивается надкостница, появляются гигантские фагоцитирующие клетки, имеющие не менее 3-х ядер. Эти клетки захватывают матрикс и освобождают место для роста новой кости и хряща, удаляя ненужный материал. Концевая часть культи становится отечной и выпячивается. В культе накапливаются однотипные дедифференцированные клетки, уподобленные эмбриональным клеткам. Через некоторое время начинается деление дедифференцированных клеток.

В отрастающую культю врастают нервы, и наступает стадия « конической бластемы». Конечность имеет форму ласта, нарастает клеточная масса, восстанавливается кровоток. Возникает «регенерационная почка».

Фаза редифференцировки . Конечность удлиняется, начинается редифференцировка, и процесс регенерации подходит к концу. Если денервировать конечность - регенерация не произойдет т.к. нервная ткань выполняет эндокринную, проводящую функции. Кроме того, нервная ткань осуществляет секрецию белкового гормона, под контролем которого осуществляется регенерация.

Репаративная регенерация может быть типичной (Гомоморфоз) и атипичной (гетероморфоз). При гомоморфози восстанавливается такой же орган, как и потерян. При гетероморфози восстановлены органы отличаются от типовых. При этом восстановление утраченных органов может проходить путем епимор- фозу, морфалаксису, ендоморфозу (или регенерационной гипертрофией), компенсаторной гипертрофией.

Способы репаративной регенерации.

Особенности восстановительных процессов у млекопитающих и человека.

Епиморфоз (от греч. ??? — после и????? — форма) — Это восстановление органа путем отрастания от раневой поверхности, подлежащей при этом чувственной перестройке. Ткани, прилегающих к поврежденному участки, рассасываются, происходит интенсивный деление клеток, дающих начало зачатке регенерата (бластемы). Затем происходит дифференцировка клеток и формирования органа или ткани. За типом епиморфозу проходит регенерация конечностей, хвоста, жабр в аксолотля, трубчатые кости от надкостницы после вылущивание диафиза у кроликов, крыс, мышцы от мышечной культи у млекопитающих и др.. К епиморфозу относится и рубцевания, при котором происходит закрытие ран, но без восстановления утраченного органа. Епиморфозна регенерация не всегда дает точную копию удаленной структуры. Такую регенерацию называют атипичной. Отличают несколько разновидностей атипичной регенерации.

Гипоморфоз (от греч. ??? — под, внизу и????? — форма) — регенерация с частичным замещением ампутированной структуры (у взрослого шпорцевых лягушки возникает остеподибна структура вместо конечности). Гетероморфоз (от греч. ?????? — другой, другой) — Появление другой структуры на месте утраченной (появление конечности на месте антенн или глаза у членистоногих).

Морфалаксис (от греч. ????? — форма, вид, ?????, ?? — обмен, смена) — это регенерация, при которой происходит реорганизация тканей с участка, оставшаяся после повреждения, почти без клеточного размножение путем перестройки. Из части тела путем перестройки образуется целая животное или орган меньших размеров. Затем размеры особи, что образовалась, или органа увеличиваются. Морфалаксис наблюдается в основном в низкоорганизованных животных, в то время как епиморфоз — в более високоорганизованых. Морфалаксис является основой регенерации гидр. гидроидных полипов, планарий. Часто морфалаксис и епиморфоз происходят одновременно, в сочетании.

Регенерация, что происходит внутри органа, называется ендоморфозом, или регенерационной гипертрофией. При этом восстанавливается не форма, а масса органа. Например, при краевом ранении печени отделенная часть органа никогда не восстанавливается. Поврежденная поверхность восстанавливается, а внутри другой части усиливается размножение клеток и в течение нескольких недель после удаления 2 / 3 печени восстанавливается исходная масса и объем, но не форма. Внутренняя структура печени оказывается нормальной, ее частички имеют типичный размер и функция органа восстанавливается. Близкой к регенерационной гипертрофии является компенсаторная гипертрофия, или викарная (заместительная). Этот средство регенерации связан с увеличением массы органа или ткани, вызванный активным физиологическим нагрузкам. Увеличение органа происходит за счет деления клеток и их гипертрофии.

Гипертрофия клеток заключается в росте, увеличении числа и размеров органелл. В связи с увеличением структурных компонентов клетки повышается ее жизнедеятельность и работоспособность. При компенса- полуторной гипертрофии отсутствует поврежденная поверхность.

Наблюдается этот вид гипертрофии при удалении одного из парных органов. Так, при удалении одной из почек другая испытывает повышенной нагрузки и увеличивается в размере. Компенсаторная гипертрофия миокарда часто возникает у больных гипертонической болезни (при сужении периферических кровеносных сосудов), при пороках клапанов. У мужчин при разрастании предстательной железы затрудняется выделение мочи и гипертрофируется стенка мочевого пузыря.

Регенерация происходит во многих внутренних органах после различных воспалительных процессов инфекционного происхождения, а также после эндогенных нарушений (нейроэндокринные расстройства, опухолевый рост, действие токсических веществ). Репаративная регенерация в различных тканях проходит по-разному. В коже, слизистых оболочках, соединительной ткани после повреждение происходит интенсивное размножение клеток и восстановление ткани, подобной утраченной. Такую регенерацию называют полной, или pecmu- туцийною. В случае неполного восстановления, при котором замещение происходит другой тканью или структурой, говорят о субституции.

Регенерация органов происходит не только после удаление их части хирургическим путем или в наследствии травмирования (механического, термического и др.), но и после переноса патологических состояний. Например, на месте глубоких ожогов могут быть массивные разрастание плотной соединительной рубцовой ткани, но нормальная структура кожи не восстанавливается. После перелома кости в отсутствие смещения отломков нормальное строение не восстанавливается, а разрастается хрящевая ткань и образуется ненастоящий сустав. При повреждении покровов восстанавливается как соединительнотканная часть, так и эпителий. Однако скорость размножены клеток рыхлой соединительной ткани является более высокой, поэтому эти клетки заполняют дефект, образуют венные волокна и после больших повреждений формируется рубцовая ткань. Чтобы не допустить этого, применяют пересадку кожи, взятой у той же или другого человека.

В настоящее время для регенерации внутренних органов применяют искусственные пористые каркасы, по которым растут ткани, регенерируют. Ткани прорастают через поры и целостность органа восстанавливается. Регенерацией за каркасом можно восстановить кровеносные сосуды, мочеточник, мочевой пузырь, пищевод, трахею и другие органы.

Стимуляция регенерационных процессов. При обычных условий эксперимента у млекопитающих ряд органов не регенерируется (головной и спинной мозг) или восстановительные процессы в них выражены слабо (кости свода черепа, сосуды, конечности). Однако существуют методы воздействия, которые позволяют в эксперименте (а иногда и в клинике) стимулировать регенерационные процессы и применительно отдельных органов добиться полноценного восстановление. К таким воздействиям относится замещения удаленных участков органов гомо-и гетеротранс- плантатом, который способствует заместительной регенерации. Сущность заместительной регенерации заключается в замещении или прорастании трансплантатов регенерационными тканями хозяина. Кроме того, трансплантат является каркасом, благодаря которому направлена??регенерация стенки органа.

Для инициирования стимуляции регенерационных процессов исследователи используют также ряд веществ разнообразной природы — экстракты из животных и растительных тканей, витамины, гормоны щитовидной железы, гипофиза, надпочечников и лекарственные препараты.